cDNA就是complementary DNA，mRNA互补的DNA，逆转录过程的产物。 要克隆真核生物不带内含子的基因时，cDNA就是个好东西，PCR的模板有木有~~~~因为是mRNA逆转录的，而细胞中的mRNA绝大多数都是不带内含子序列

先回答：会有很大差异 稀释除了降低cDNA的量，有一个非常非常重要的作用，是为了降低杂质对反应的影响。 以qPCR的 检测灵敏度，上样量在100 ng左右就足够了，在此基础上还可以进一步稀释到40-60ng 。 qPCR的差异不能只看Ct值，还需要结合 熔解曲线。

我想回答来着，先占个草稿。 首先：逆转录酶的三个活性没有问题：①以RNA作为模板合成互补DNA链 (complementary DNA, cDNA)，形成RNA:cDNA杂交链；②发挥RNase H活性，降解RNA:DNA杂交链中的RNA模板；③以cDNA作为模板合成第二链DNA，形成双链DNA。 那么为什么是单链呢，如果我们破坏掉逆转录酶的RNase活性 ...

2020年12月31日 · NCBI有个优点：由于一个蛋白有好多基因名，你无论输入哪个都可以。哪个都能匹配到。 3、这时候，你会进入这个界面。这时候，你需要选择你的目标种属。我的目标种属的人，因此选择第一个。 点击 COL1A1。

cDNA得到之后理论上是稳定的，像是正常DNA保存就可以，-20℃就可以，但如果不放心，建议不稀释，小量分装到PCR管中-80℃保存。

complementary DNA，互补脱氧核糖核酸。与mRNA链互补的单链DNA，以其mRNA为模板，在适当 引物的存在下，由m RNA与DNA进行一定条件下合成的，就是cDNA。

2021年5月13日 · 利用引物。 一般我们做RT-PCR（这里RT是reverse transcription不是real time） 和qPCR测量 基因表达量，在RT-PCR阶段利用oligo dT primer或者随机六聚体（附一张 逆转录试剂盒 的protocol）把整个mRNA文库逆转录成cDNA 文库，尔后，在qPCR阶段用基因特异性引物从文库中扩增 目的基因。 针对非mRNA的扩增我没有做过，也 ...

我一般的设计： RNA充足时 取总量150ng RNA 逆转录 假定逆转录效率100%那么96孔平板每孔加3ng cDNA 质量中上的RNA这种量GAPDH和bACTIN的Ct大约在18-20左右 RNA不充足时 三分之一或者四分之一也能做出来 无非就是所有Ct上调1-2（因为是指数）

加入RNA样本、随机引物、逆转录酶（如M-MLV逆转录酶）、dNTP和反转录缓冲液，在逆转录反应中将RNA转化为cDNA； 在逆转录反应中添加RNaseH酶消化RNA模板，以避免后续PCR反应中RNA模板的干扰；

2022年4月1日 · 而cDNA是对应mRNA的反向 互补序列。 差异有两点，（1）cDNA序列可以包含UTR（非翻译区）序列；（2）严格意义上来讲，CDS是sense序列，即和mRNA一致的那条链，而cDNA是mRNA的反向互补序列，是antisense序列。